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UV1901紫外可見分光光度計測葉綠素含量的方法
紫外可見分光光度計時實驗室里zui常用，也是對分析人員來說zui有用的分析工具之一。幾乎每個分析實驗室都離不開紫外可見分光光度計。其原理是根據(jù)物質分子對光的選擇性吸收特性所建立起來的一種定性、定量的分析方法。操作簡單、準確度高、重現(xiàn)性好。分光光度計測量是關于物質分子對不同波長和特定波長處的光的吸收程度的測量。物質的吸收光譜本質上就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有不同的分子、原子和不同分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量，這是分光光度計定性和定量分析的基礎。分光光度計分析就是根據(jù)物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。
UV1901紫外可見分光光度計測葉綠素含量的原理：測定葉綠素提取液在zui大吸收波長下的吸光值，即可用朗伯—比爾定律計算出提取液中各色素的含量。
葉綠素a 和葉綠素b 在645nm 和663nm 處有zui大吸收，且兩吸收曲線相交于652nm 處。因此測定 提取液在645nm、663nm、652nm 波長下的吸光值，并根據(jù)經驗公式可分別計算出葉綠素a、葉綠素b 和總葉綠素的含量。
儀器 
UV1901紫外可見分光光度計（上海奧析科學儀器有限公司）
UV1901紫外可見分光光度計采用濱松無臭氧環(huán)保型氘燈，普通長壽命氘燈會有臭氧產生，長期吸入對身體有害，無臭氧長壽命氘燈就可以有效避免。儀器還采用德國歐士朗鎢燈，美國派來芝檢測器，雙光束光學系統(tǒng)，加厚光學底板，更能保證儀器的穩(wěn)定性。操作界面和操作系統(tǒng)都是簡便快捷版的，減少了檢測時間的同時，增加準確性.吸光度可以到小數(shù)點后四位?？蛇x配多種附件，自動四聯(lián)池，七聯(lián)池，恒溫裝置，透過率固體架，反射率固體架等。

UV1901紫外可見分光光度計的顯示方式：6英寸 320×240 點陣帶背光數(shù)字 LCD 
光源燈：預調日本濱松無臭氧環(huán)保型氘燈 歐司朗長壽命鹵鎢燈 
光學系統(tǒng)：精密雙光束光學系統(tǒng)
接口：RS232C串行通訊口用于接配軟件，并行打印口用于接配打印機
光譜掃描功能：主機及軟件支持
電源電壓：100V～240V   50/60±1Hz
儀器尺寸：650×450×220（mm）
凈重：25Kg
特點
UV1901紫外可見分光光度計的光學系統(tǒng)設計和電路控制系統(tǒng)設計十分嚴謹,元器件的選用控制嚴格,具有高標準的準確度、重復性、低噪聲和低雜散光指標，線性范圍和穩(wěn)定性指標也十分出色。有1nm和2nm帶寬兩種配置適合不同用戶選擇，大屏幕LCD顯示，具高測量精度和穩(wěn)定性，是一款高品質的儀器。
UV1901紫外可見分光光度計使用日本濱松無臭氧環(huán)保型氘燈，使用壽命達到2000小時，光輸出可保持穩(wěn)定直至其使用壽命，替換極為方便。
UV1901紫外可見分光光度計提供2種操作模式：主機測量模式或軟件控制測量模式。
內建的SCM技術和定性定量分析軟件能實現(xiàn)數(shù)據(jù)采集與處理、光譜測量、動力學測量、定量分析、DNA測定和光譜掃描等擴展功能。菜單下拉式分析軟件易于操作。
UV1901紫外可見分光光度計具有開放式的樣品室，可選配反射樣品架、固體樣品架、恒溫水浴和自動進樣器等適合于不同的應用。
單機掃描曲線可以存儲9條，工作曲線可以存儲9條。聯(lián)機模式儲存數(shù)量不限。
主要技術指標   
型號    UV1901型    UV1902型
測光方式    透過率，吸光度，能量，反射率
光譜帶寬    1nm    2nm
波長范圍    190nm～1100nm
波長準確度    ≤±0.3nm
波長重復性    ≤0.1nm
★光度范圍    0-999.9%(?),-4A～4A，0-9999C，1-9999F
光度準確度       ≤±0.3%(?) (0～100%?)
≤±0.002A(0～0.)
≤±0.004A(0.5～1A)
光度重復性      ≤0.15%(?) (0-100%?)
≤0.001A(0～0.)
≤0.002A(0.5～1A)
雜光    ≤0.03%(?) （220nm NaI，360nm NaNO2））
★穩(wěn)定性         ≤±0.0004A/h（500nm，開機預熱30min）
噪聲    ≤±0.0003A
★基線平直度    ≤±0.001A（190～1100nm）    ≤±0.0008A（190～1100nm）
★導數(shù)分辨率    >0.5
掃描速度    快      中     慢

分析軟件
舒適的操作感受和豐富的分析功能--UVCON系列定性定量數(shù)據(jù)處理分析軟件

UVCON系列定性定量數(shù)據(jù)處理分析軟件是為上海奧析科學儀器有限公司的1700、1800和1900三個系列儀器的分析軟件。通過通訊電纜將儀器主機的RS232C通訊口與電腦上的串行通訊口或USB口聯(lián)接，利用軟件對主機的運行進行控制，并對主機采集到的數(shù)據(jù)進行分析、處理或輸出，幫助完成從常規(guī)質控到環(huán)保、生物化學、醫(yī)學衛(wèi)生、材料等諸多領域的分析研究。

動力學測量可測定從1秒-10小時的透射比或吸光度的時間變化，記錄間隔從0.1-60秒，可以觀察快速的反應和變化。在數(shù)據(jù)處理功能中有峰谷檢測和導數(shù)運算。

電子頂載天平(感量0．01g)、研缽、棕色容量瓶、小漏斗、定量濾紙、吸水紙、擦境紙、滴管。 原料新鮮(或烘干)的植物葉片 試劑 1. 96％乙醇(或80％丙酮) 2. 石英砂 3. 碳酸鈣粉 
四、操作步驟
取新鮮植物葉片(或其它綠色組織)或干材料，擦凈組織表面污物，去除中脈剪碎。稱取剪碎的新鮮樣品2g，放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及3mL95％乙醇，研成均漿，再加乙醇10mL，繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3～5min。 
取濾紙1張置于漏斗中，用乙醇濕潤，沿玻棒把提取液倒入漏斗，濾液流至100mL 棕色容量瓶中；用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘渣數(shù)次，zui后連同殘渣一起倒入漏斗中。 用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘渣中無綠色為止。zui后用乙醇定容至100mL，搖勻。 取葉綠體色素提取液在波長665nm、645nm 和652nm 下測定吸光度，以95％乙醇為空白對照。
五、計算 
按照實驗原理中提供的經驗公式，分別計算植物材料中葉綠素a、b 和總葉綠素的含量。