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紫外可見分光光度計乙釀基測定法
更新時間:2016-04-08 點擊次數(shù):2501

O -乙釀基測定法

試劑 1) 2mol/L鹽酸羥胺溶液稱取鹽酸羥胺

13. 9g,加水溶解并稀釋至100ml,冷處保存。

(2) 3.5mol/L氫氧化鈉溶液稱取氫氧化鈉14.0g

3 1 1 8 己二酰肼含量測定法

加水使溶解并稀釋至100ml。

(3) 4mol/L鹽酸溶液量取鹽酸33.3ml,加水稀釋

100ml的溶液。

(4) 0. 37mol/L三氯化鐵-鹽酸溶液稱取三氯化鐵

(FeCl3 • 6 H 20) 10. 0 g ,0. lmol/L鹽酸溶液溶解并稀

釋至100ml。

(5) 堿性羥胺溶液量戚等體積的鹽酸羥胺溶液

(2mol/L)與氫氧化鈉溶液(3.5mol/L)混合。3 小時內

使用。

對照品溶液的制備精密稱取已干燥至恒重的氯化乙

酰膽堿22. 7mg (或溴化乙酰膽堿28. 3 m g ) ,50ml量瓶

中,加O.OOlmol/L醋酸鈉溶液(pH4. 5) 溶解并稀釋至

刻度,搖勻。

供試品溶液的制備取供試品,用水稀釋成O 乙酰

基濃度為0. 5?2. 5 m m o I / L的溶液。

測定法精密量取氯化乙酰膽堿(或溴化乙酰膽堿)

對照品溶液 0. 2ml、0.4ml、0.6ml0.8ml、1.0ml,分別

置試管中,補加水至lml,加新鮮配制的堿性羥胺溶液

2 m l ,搖勻,于室溫放置4 分鐘,加4mol/L鹽酸lml, 調

p H 值至1.2±0.2,搖勻,加0. 37mol/L三氯化鐵-鹽酸

溶液lml,搖勻,照紫外-可見分光光度法(通則0401) ,

在波長5 4 0 n m處測定吸光度。另精密量取上述相應的系

列對照品溶液,自補加水至lml起,除加酸與加堿性

羥胺的次序顛倒外,同法操作,用作對應的空白對照。

精密量取供試品溶液l ml置試管中,自“加新鮮配制

的堿性羥胺溶液2ml起,同法操作;另取供試品溶液

l m i ,與對照品溶液的空白對照同法操作,用作供試品的

空白對照。

將標準管各吸光度分別減去相應的空白對照管的吸光

度,以標準管中所含的對照品溶液的體積對其相應的吸光

度作直線回歸,將供試品的吸光度減去相應的空白對照管

的吸光度后代入直線回歸方程,計算出每lml供試品相當

于對照品溶液的體積(V ml)。

供試品中0乙?;浚?/span>mmol/L) = V X 2 . 5

式中2. 5 為對照品溶液中乙酰膽堿的含量(mmol/L)

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