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分光光度計(jì)工作原理的限制性條件
更新時(shí)間:2015-08-12 點(diǎn)擊次數(shù):3019
 大家知道分光光度計(jì)的工作原理是1、物質(zhì)對(duì)光的選擇吸收,2、瑯伯-比爾定律。
我們這里討論瑯伯-比爾定律的限制性條件。其一:通過(guò)溶液的光必須是平行的;其二:通過(guò)溶液的光必須是單色光;其三:待測(cè)溶液必須是純凈的、均勻的且濃度不宜過(guò)高,這是瑯伯-比爾定律首要的三個(gè)前提條件。但是在實(shí)際的分光光度計(jì)的制造和使用過(guò)程中這三個(gè)條件是不可能達(dá)到的。其一:因?yàn)楣馐侵本€(xiàn)傳播的,在分光光度計(jì)制造過(guò)程中,燈源發(fā)出的光是發(fā)散的,經(jīng)過(guò)聚焦鏡進(jìn)行聚焦等直到經(jīng)過(guò)溶液的整體過(guò)程中,光是不可能平行的。其二:燈源發(fā)出的光是復(fù)合光,經(jīng)過(guò)狹縫,再經(jīng)過(guò)光柵分光等步驟,因?yàn)槭艿姜M縫和光柵本身的限制,光柵分光不可能達(dá)到純單色光。還有光度計(jì)的整體設(shè)計(jì)問(wèn)題,光度計(jì)不可能沒(méi)有其它的雜光存在。其三:用戶(hù)的溶液也不可能是純凈的,也會(huì)含有一些雜質(zhì),這些對(duì)光度的吸收都會(huì)存在影響。除以上三個(gè)方面的影響外,在實(shí)際的光度計(jì)應(yīng)用過(guò)程中還會(huì)存在其他因素的影響,例如:1、經(jīng)過(guò)比色皿的光是否垂直;2、比色皿寬度是否為10mm的標(biāo)準(zhǔn)值;3、測(cè)試波長(zhǎng)是否準(zhǔn)確;4、程序設(shè)計(jì)是否存在漏洞等等,都會(huì)直接影響到利用瑯伯-比爾定律計(jì)算出的結(jié)果。

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